Pcr-rflp for identification of the pearl oyster Pinctada imbricate from Brazil and Venezuela / Pcr-rflp para identificação de ostras perlíferas (Pinctada imbricate) do Brasil e Venezuela

Oysters of the genus Pinctada are of great economic importance due to their extensive use in human feeding and pearl cultivation. It includes four species: Pinctada radiata (Europe), P. imbricata (Western Atlantic)and the P. fucata-martensi complex (Pacific), the latter being a species complex of difficult morphological differentiation. Although this species complex has several molecular studies corroborating each species as valid, there are still doubts about the validity of P. imbricata in the South of Western Atlantic (ie Brazilian Coast). Here we carried out a RFLP study with populations from Ceará, Rio de Janeiro, São Paulo and Venezuela coast. We analyzed mitochondrial (16S) and nuclear genes (partial IGS). This study confirms the Brazilian and Venezuelan stocks as genetically close to the P. imbricata stocks from Caribbean than the P. martensi-fucata complex. This result is important for pearl-oyster farmers, demonstrating that the Brazilian and Venezuelan stocks are not alien species or hybrids of Indo-Pacific species.(AU)

As ostras do género Pinctada são de grande importância económica devido ao seu uso extensivo na alimentação humana e cultivo de pérolas. Inclui quatro espécies: Pinctada radiata (Europa), P. imbricata (Atlântico Ocidental) e P. fucatamartensi (Pacífico), sendo esta última uma espécie complexa de difícil diferenciação morfológica. Embora este complexo de espécies tenha vários estudos moleculares corroborando cada espécie como válida, ainda há dúvidas sobre a validade de P. imbricata no Sul do Atlântico Ocidental. Neste trabalho realializou-se um estudo de RFLP com populações do Ceará, Rio de Janeiro, São Paulo e costa da Venezuela. Foram analisados genes mitocondriais (16S) e nucleares (IGS parcial). Este estudo confirma que os espécimes brasileiros e venezuelanos são geneticamente mais próximos às populações de P. imbricata do Caribe do que o complexo P. martensi-fucata. Esse resultado é importante para os produtores de ostras perlíferas, demonstrando que os estoques brasileiro e venezuelano não são espécies exóticas ou híbridas de espécies indo-pacíficas.(AU)

Pcr-rflp for identification of the pearl oyster Pinctada imbricate from Brazil and Venezuela / Pcr-rflp para identificação de ostras perlíferas (Pinctada imbricate) do Brasil e Venezuela

Oysters of the genus Pinctada are of great economic importance due to their extensive use in human feeding and pearl cultivation. It includes four species: Pinctada radiata (Europe), P. imbricata (Western Atlantic)and the P. fucata-martensi complex (Pacific), the latter being a species complex of difficult morphological differentiation. Although this species complex has several molecular studies corroborating each species as valid, there are still doubts about the validity of P. imbricata in the South of Western Atlantic (ie Brazilian Coast). Here we carried out a RFLP study with populations from Ceará, Rio de Janeiro, São Paulo and Venezuela coast. We analyzed mitochondrial (16S) and nuclear genes (partial IGS). This study confirms the Brazilian and Venezuelan stocks as genetically close to the P. imbricata stocks from Caribbean than the P. martensi-fucata complex. This result is important for pearl-oyster farmers, demonstrating that the Brazilian and Venezuelan stocks are not alien species or hybrids of Indo-Pacific species.

As ostras do género Pinctada são de grande importância económica devido ao seu uso extensivo na alimentação humana e cultivo de pérolas. Inclui quatro espécies: Pinctada radiata (Europa), P. imbricata (Atlântico Ocidental) e P. fucatamartensi (Pacífico), sendo esta última uma espécie complexa de difícil diferenciação morfológica. Embora este complexo de espécies tenha vários estudos moleculares corroborando cada espécie como válida, ainda há dúvidas sobre a validade de P. imbricata no Sul do Atlântico Ocidental. Neste trabalho realializou-se um estudo de RFLP com populações do Ceará, Rio de Janeiro, São Paulo e costa da Venezuela. Foram analisados genes mitocondriais (16S) e nucleares (IGS parcial). Este estudo confirma que os espécimes brasileiros e venezuelanos são geneticamente mais próximos às populações de P. imbricata do Caribe do que o complexo P. martensi-fucata. Esse resultado é importante para os produtores de ostras perlíferas, demonstrando que os estoques brasileiro e venezuelano não são espécies exóticas ou híbridas de espécies indo-pacíficas.

Anatomical differences among specimens of Pinctada imbricata Rõding, 1798 from different South American localities / Diferenças anatômicas entre espécimes de Pinctada imbricata Rõding, 1798 de diferentes localidades da América do Sul

In the present study, we compared the internal and external anatomy of pearl oyster (Pinctada imbricata Rõding, 1798) from some South American localities, including Venezuela and several regions of Brazil. The anatomical data shows non-geographical variations characterized by variable outline in adults, different degrees of posterior auricle shell development and mantle papillae ranging from normal to digitiform. The geographical variations can be divided into two major groups: the Venezuelan group presents a more folded mantle; pallial muscle grouped in anterior and median-posterior sets; poorly-developed perpendicular mantle groove; inner lamella not extended into the anterior mantle. Brazilian group specimens present a smoother mantle, with less clear separation between anterior and posterior mantle muscle groups; externally-developed perpendicular groove; inner lamella extension developed in anterior mantle. These differences may represent ecophenotypes or differences among isolated South American populations, which may be elucidated by subsequent phylogeographic studies.(AU)

No presente estudo comparou-se a anatomia da ostra perlífera (Pinctada imbricata Rõding, 1798) de algumas localidades da América do Sul, incluindo a Venezuela e várias regiões do Brasil. Foram encontradas variações não geográficas e geográficas. As variações não geográficas foram caracterizadas por adultos com contorno bem variável, diferentes graus de desenvolvimento da aurícula posterior e papilas da lamela interna do manto variando de normal a digitiformes. Variações geográficas podem ser divididas em dois grandes grupos: o grupo venezuelano apresentou um manto mais pregueado; musculatura palial agrupada em dois conjuntos de feixes um anterior e outro mediano-posterior; sulco perpendicular do manto pouco desenvolvido. Espécimes dos grupos brasileiros apresentaram um manto menos pregueado, com separação menos nítida entre os feixes musculares paliais anterior e posterior do manto; sulco perpendicular do manto bem desenvolvido; lamela interna do manto se estendendo externamente na região do manto anterior. Essas diferenças podem ser ecofenótipos ou diferenças entre as populações com certo grau de isolamento da América do Sul, que podem ser elucidados por estudos filogeográficos subsequentes.(AU)

Anatomical differences among specimens of Pinctada imbricata Rõding, 1798 from different South American localities / Diferenças anatômicas entre espécimes de Pinctada imbricata Rõding, 1798 de diferentes localidades da América do Sul

In the present study, we compared the internal and external anatomy of pearl oyster (Pinctada imbricata Rõding, 1798) from some South American localities, including Venezuela and several regions of Brazil. The anatomical data shows non-geographical variations characterized by variable outline in adults, different degrees of posterior auricle shell development and mantle papillae ranging from normal to digitiform. The geographical variations can be divided into two major groups: the Venezuelan group presents a more folded mantle; pallial muscle grouped in anterior and median-posterior sets; poorly-developed perpendicular mantle groove; inner lamella not extended into the anterior mantle. Brazilian group specimens present a smoother mantle, with less clear separation between anterior and posterior mantle muscle groups; externally-developed perpendicular groove; inner lamella extension developed in anterior mantle. These differences may represent ecophenotypes or differences among isolated South American populations, which may be elucidated by subsequent phylogeographic studies.

No presente estudo comparou-se a anatomia da ostra perlífera (Pinctada imbricata Rõding, 1798) de algumas localidades da América do Sul, incluindo a Venezuela e várias regiões do Brasil. Foram encontradas variações não geográficas e geográficas. As variações não geográficas foram caracterizadas por adultos com contorno bem variável, diferentes graus de desenvolvimento da aurícula posterior e papilas da lamela interna do manto variando de normal a digitiformes. Variações geográficas podem ser divididas em dois grandes grupos: o grupo venezuelano apresentou um manto mais pregueado; musculatura palial agrupada em dois conjuntos de feixes um anterior e outro mediano-posterior; sulco perpendicular do manto pouco desenvolvido. Espécimes dos grupos brasileiros apresentaram um manto menos pregueado, com separação menos nítida entre os feixes musculares paliais anterior e posterior do manto; sulco perpendicular do manto bem desenvolvido; lamela interna do manto se estendendo externamente na região do manto anterior. Essas diferenças podem ser ecofenótipos ou diferenças entre as populações com certo grau de isolamento da América do Sul, que podem ser elucidados por estudos filogeográficos subsequentes.

Growth and survival of the pearl oyster Pteria hirundo (L.,1758) in an intermediate stage of culture in Santa Catarina, Brazil / Crescimento e sobrevivência da ostra perlífera Pteria hirundo (L., 1758) em cultivo intermediário em Santa Catarina, Brasil

There are no records in Brazil for the culture of Pteridae family oysters, genus Pteria and Pinctada. The intermediate culture can be considered one of the critical stages during the oyster farming. The changes in life conditions from a semi-closed environment provided by the collector to the structures utilized for the growth represents a considerable stress factor to which the animals are subjected. The goal of the present study was to evaluate the growth and survival of the pearl oyster Pteria hirundo (Linnaeus, 1758) kept in intermediate lanterns. Seeds of P. hirundo, obtained through larviculture carried out at the Marine Molluscs Laboratory (UFSC), southern Brazil were detached from the collectors, transferred and kept in an intermediate culture system (oyster lantern). During 6 months, growth (dorso-ventral height - DVH in mm) and survival ( percent) were evaluated. Two size classes were tested: medium (M), between 3.4 and 4.4 mm, and large (L), bigger than 4.5 mm. The density of occupation in each floor of the lantern was 50 percent. At the end of the experiment, the survivals observed were 90 and 94 percent for the sizes M and L, respectively. Medium juveniles of Pteria hirundo had an average (Std) increase of 16.1 (±4.38) mm in the dorso-ventral height, and large juveniles an average increase of 11.4 (±3.77) mm after six months of experiment. The results observed during the intermediate stage of cultivation indicate that Pteria hirundo presents survival and growth similar to other species of pearl oysters traditionally used in the pearl industry in several countries.

No Brasil, não há registro de cultivos para ostras da família Pteridae, gêneros Pteria e Pinctada. O cultivo intermediário pode ser considerado um dos estágios críticos no processo de cultivo, pois a mudança nas condições de vida de um ambiente semifechado oferecido pelo coletor de sementes para as estruturas intermediárias utilizadas para criar os animais representa um fator de estresse considerável ao qual estes são submetidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento e a sobrevivência de ostras perlíferas Pteria hirundo (Linnaeus, 1758) mantidas em lanternas intermediárias. Sementes de P. hirundo, obtidas em larvicultura realizada no Laboratório de Moluscos Marinhos da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC), sul do Brasil, foram destacadas dos coletores, transferidas e mantidas em sistema intermediário de cultivo, Durante seis meses, foram avaliados o crescimento (altura dorso ventral - DVH - em mm) e a sobrevivência ( por cento). Foram avaliadas duas classes de tamanho: média (M) - entre 3,4 e 4,4 mm, e grande (G) - maior que 4,5 mm. A densidade de ocupação de cada andar da lanterna foi de 50 por cento da área superficial do andar. Ao final do período avaliado, a sobrevivência dos indivíduos da classe M foi 90 por cento e, para a classe G, foi 94 por cento. Animais M de P. hirundo tiveram um crescimento médio (desvio padrão) de 16,1 mm (±4,38) de altura dorso ventral e os animais G apresentaram um aumento médio de 11,4 mm (±3,77). Os resultados observados, durante a etapa de cultivo intermediário, indicam que Pteria hirundo apresenta sobrevivência e crescimento semelhantes a outras espécies de ostras perlíferas, tradicionalmente utilizadas na indústria de pérolas em diversos países.

Growth and survival of the pearl oyster Pteria hirundo (L.,1758) in an intermediate stage of culture in Santa Catarina, Brazil

There are no records in Brazil for the culture of Pteridae family oysters, genus Pteria and Pinctada. The intermediate culture can be considered one of the critical stages during the oyster farming. The changes in life conditions from a semi-closed environment provided by the collector to the structures utilized for the growth represents a considerable stress factor to which the animals are subjected. The goal of the present study was to evaluate the growth and survival of the pearl oyster Pteria hirundo (Linnaeus, 1758) kept in intermediate lanterns. Seeds of P. hirundo, obtained through larviculture carried out at the Marine Molluscs Laboratory (UFSC), southern Brazil were detached from the collectors, transferred and kept in an intermediate culture system (oyster lantern). During 6 months, growth (dorso-ventral height - DVH in mm) and survival (%) were evaluated. Two size classes were tested: medium (M), between 3.4 and 4.4 mm, and large (L), bigger than 4.5 mm. The density of occupation in each floor of the lantern was 50%. At the end of the experiment, the survivals observed were 90 and 94% for the sizes M and L, respectively. Medium juveniles of Pteria hirundo had an average (Std) increase of 16.1 (±4.38) mm in the dorso-ventral height, and large juveniles an average increase of 11.4 (±3.77) mm after six months of experiment. The results observed during the intermediate stage of cultivation indicate that Pteria hirundo presents survival and growth similar to other species of pearl oysters traditionally used in the pearl industry in several countries.

No Brasil, não há registro de cultivos para ostras da família Pteridae, gêneros Pteria e Pinctada. O cultivo intermediário pode ser considerado um dos estágios críticos no processo de cultivo, pois a mudança nas condições de vida de um ambiente semifechado oferecido pelo coletor de sementes para as estruturas intermediárias utilizadas para criar os animais representa um fator de estresse considerável ao qual estes são submetidos. Este trabalho teve como objetivo avaliar o crescimento e a sobrevivência de ostras perlíferas Pteria hirundo (Linnaeus, 1758) mantidas em lanternas intermediárias. Sementes de P. hirundo, obtidas em larvicultura realizada no Laboratório de Moluscos Marinhos da Universidade Federal de Santa Catarina (UFSC), sul do Brasil, foram destacadas dos coletores, transferidas e mantidas em sistema intermediário de cultivo, Durante seis meses, foram avaliados o crescimento (altura dorso ventral - DVH - em mm) e a sobrevivência (%). Foram avaliadas duas classes de tamanho: média (M) - entre 3,4 e 4,4 mm, e grande (G) - maior que 4,5 mm. A densidade de ocupação de cada andar da lanterna foi de 50% da área superficial do andar. Ao final do período avaliado, a sobrevivência dos indivíduos da classe M foi 90% e, para a classe G, foi 94%. Animais M de P. hirundo tiveram um crescimento médio (desvio padrão) de 16,1 mm (±4,38) de altura dorso ventral e os animais G apresentaram um aumento médio de 11,4 mm (±3,77). Os resultados observados, durante a etapa de cultivo intermediário, indicam que Pteria hirundo apresenta sobrevivência e crescimento semelhantes a outras espécies de ostras perlíferas, tradicionalmente utilizadas na indústria de pérolas em diversos países.

Caracterização funcional e ultraestrutural dos hemócitos da ostra perlifera Pteria hirundo

A ostra perlífera Pteria hirundo possui um grande potencial para a aquicultura nacional, pois além de apresentar potencialidade para o consumo, essa espécie possui a capacidade de produzir pérolas. Apesar do seu potencial para cultivo, pouco ainda se conhece a respeito da sua fisiologia e sistema imune. O presente estudo teve por objetivo identificar e caracterizar morfológica e ultraestruturalmente os hemócitos de P. hirundo, bem como identificar as populações hemocitárias e avaliar algumas respostas celulares e humorais de defesa frente a uma infecção bacteriana. Três populações de hemócitos foram encontradas: hemócitos hialinos (HH), hemócitos granulares (HG) e células blásticas (CB). A população mais abundante na circulação foi a de HH (88,2%), que se caracterizaram pela presença de poucos a nenhum grânulo em seu citoplasma, seguida pelos HG (9,4%) com muitos grânulos grandes e elétron-lúcidos no citosol, e as CB (2,4%) que foram os menores hemócitos e se caracterizaram por possuir forma esférica e uma alta razão núcleo-citoplasma. Três diferentes subpopulações de HH foram identificadas (HH-1, HH-2 e HH-3), apresentando diferenças quanto ao tamanho celular e à complexidade interna. Os hemócitos apresentaram uma elevada capacidade fagocítica ex vivo de partículas inertes (38,5% dos hemócitos avaliados). Além disso, essas células mostraram-se aptas a produzir moléculas microbicidas como as espécies reativas de oxigênio (ERO), porém esta produção não foi induzida por lipopolissacarídeos (LPS) bacterianos. Os principais produtores deste composto microbicida foram os HH-1, HG e HH-3. A presença de moléculas aglutinantes na hemolinfa de ostras previamente desafiadas com a Vibrio alginolyticus foi demonstrada por meio da aglutinação in vitro de bactérias marinhas Vibrio harveyi e V. alginolyticus (título aglutinante 256× e 1024×, respectivamente). Contudo, as bactérias marinhas Gram-positivas, Mycobacterium maritypicum e Corynebacterium stationis não foram aglutinadas. O número total de hemócitos circulantes (THC) nas ostras sadias foi de 8,53 ± 4,27×106 células/mL, no entanto 24 h após infecção com V. alginolyticus (ou injeção com salina), o hemograma caiu pela metade. A caracterização ultraestrutural e funcional dos hemócitos de P. hirundo abre perspectivas para estudos visando à prevenção e ao controle de enfermidades em pterídeos com interesse aquícola

The pearl oyster Pteria hirundo (Pteridae family) has a great potential in national aquaculture due to its gastronomic appeal and to its capacity to produce pearls. Despite of its economic importance, little is known about its physiology and immune system. Thus, the aim of the present study was to identify and characterize at morphological and ultrastructural levels the hemocytes of P. hirundo, as well to identify its hemocyte populations and evaluate some cellular and humoral defenses in response to a bacterial infection. Three main hemocyte populations were recognized, represented by hyaline hemocytes (HH), granular hemocytes (GH) and blast cells (BC). The most abundant population comprised the hyaline hemocytes (88.2%) which were characterized by the presence few or no granules in the cytoplasm, followed by the granular hemocytes (9.4%) which have a great number of large electron lucid granules, and blast cells (2.4%) which were the smallest hemocytes, showing a spherical format and a high nucleus/cytoplasm ratio. Three different subpopulations of HH were identified (HH-1, HH-2 and HH-3), showing differences in terms of cellular volume and internal complexity. The hemocytes showed an elevated phagocytic capacity ex-vivo for inert particles (38.5% of the evaluated hemocytes). Besides, these cells are able to produce microbicidal molecules, such as reactive oxygen species (ROS), but the production of these molecules were not induced by bacterial lipopolysaccharides (LPS). The main ROS-producing cells were the HH-1, GH and HH-3. The presence of agglutinating molecules in the hemolymph of pearl oysters pre-challenged with the Gram-negative Vibrio alginolyticus was demonstrated by the in vitro agglutination of marine Vibrio species, V. harveyi and V. alginolyticus (agglutinating title of 256× and 1024×, respectively). However, the marine Gram-positive bacteria Mycobacterium maritypicum and Corynebacterium stationis were not agglutinated by the oyster hemolymph. The total count of circulating hemocytes in apparently healthy animals was 8.53 ± 4.27×106 cells/mL, but after an experimental injection of a bacterial solution (V. alginolyticus) or saline, the number of hemocytes significantly dropped (2×). In conclusion, the hemolymph of P. hirundo contains the typical hemocyte types found in bivalves and the ultrastructural and functional characterization of these cells represents a pioneering study that opens new perspectives for a better understanding of the immune reactions of this pearl oyster, aiming the prevention and control of infectious diseases in pteridean species of aquaculture importance

Anatomical differences among specimens of Pinctada imbricata Röding, 1798 from different South American localities / Diferenças anatômicas entre espécimes de Pinctada imbricata Röding, 1798 de diferentes localidades da América do Sul

In the present study, we compared the internal and external anatomy of pearl oyster (Pinctada imbricata Röding, 1798) from some South American localities, including Venezuela and several regions of Brazil. The anatomical data shows non-geographical variations characterized by variable outline in adults, different degrees of posterior auricle shell development and mantle papillae ranging from normal to digitiform. The geographical variations can be divided into two major groups: the Venezuelan group presents a more folded mantle; pallial muscle grouped in anterior and median-posterior sets; poorly-developed perpendicular mantle groove; and inner lamella not extended into the anterior mantle. Brazilian group specimens present a smoother mantle, with less clear separation between anterior and posterior mantle muscle groups; externally-developed perpendicular groove; and inner lamella extension developed in anterior mantle. These differences may represent ecophenotypes or differences among isolated South American populations, which may be elucidated by subsequent phylogeographic studies.

No presente estudo comparou-se a anatomia da ostra perlífera (Pinctada imbricata Röding, 1798) de algumas localidades da América do Sul, incluindo a Venezuela e várias regiões do Brasil. Foram encontradas variações não geográficas e geográficas. As variações não geográficas foram caracterizadas por adultos com contorno bem variável, diferentes graus de desenvolvimento da aurícula posterior e papilas da lamela interna do manto variando de normal a digitiforme. Variações geográficas podem ser divididas em dois grandes grupos: o grupo venezuelano apresentou manto mais pregueado; musculatura palial agrupada em dois conjuntos de feixes um anterior e outro mediano-posterior; e sulco perpendicular do manto pouco desenvolvido. Espécimes dos grupos brasileiros apresentaram manto menos pregueado, com separação menos nítida entre os feixes musculares paliais anterior e posterior do manto; sulco perpendicular do manto bem desenvolvido; e lamela interna do manto estendendo-se externamente na região do manto anterior. Essas diferenças podem ser ecofenótipos ou diferenças entre as populações com certo grau de isolamento da América do Sul, diferenças essas que podem ser elucidados por estudos filogeográficos subsequentes.  

Captação de sementes em coletores artificiais e cultivo da ostra perlífera Pinctada imbricata (Mollusca: Pteriidae), São Paulo, Brasil

O cultivo de ostras perlíferas ainda é realizado apenas experimentalmente no Brasil. Entretanto, algumas espécies como Pinctada imbricata apresentam um bom potencial para a produção comercial. A ocorrência constante de jovens dessa espécie associados a coletores e redes de mexilhões pode tornar viável a obtenção de sementes para cultivo diretamente do ambiente natural, no entanto, são necessários estudos sobre a forma dessa coleta e o cultivo da espécie. Neste sentido, este estudo teve como objetivo determinar as épocas mais favoráveis para a captação de juvenis de P. imbricata em coletores artificiais e avaliar o seu desempenho em diferentes estruturas de cultivo na Praia da Cocanha, Caraguatatuba, Estado de São Paulo, contribuindo assim para a definição de uma tecnologia de cultivo para essa espécie no Brasil. Para isso, avaliou-se a captação de sementes em coletores artificiais em três profundidades (superfície, 1 e 2 metros) e o desempenho da espécie em diferentes estruturas de cultivo (rede de mexilhão, lanternas berçário e engorda) e densidades de estocagem durante as fases intermediária (80, 119 e 159 ostras por 1000 cm2) e de engorda (25, 51 e 76 ostras por 1000 cm2). Os resultados mostraram que a quantidade de P. imbricata captada a partir do ambiente natural parece ser suficiente para iniciar e manter cultivos comerciais dessa espécie na região de estudo (média de 146 sementes por metro de coletor). A estrutura de cultivo que mostrou ser mais adequada para o cultivo desta espécie foi a lanterna de engorda, que apresentou menor variabilidade na sobrevivência e maior durabilidade e assim deve ser recomendada. Os parâmetros zootécnicos avaliados não diferiram significativamente para as três densidades testadas, sugerindo que maiores densidades podem ser utilizadas. O crescimento na fase de engorda mostrou-se menor do que o registrado para a mesma espécie em outros países onde é cultivada. Mais estudos são necessários para fins de produção comercial da espécie no Litoral Norte de São Paulo